[合集]生物實驗報告15篇

　　在人們素養不斷提高的今天，越來越多人會去使用報告，不同的報告內容同樣也是不同的。為了讓您不再為寫報告頭疼，下面是小編收集整理的生物實驗報告，供大家參考借鑒，希望可以幫助到有需要的朋友。

生物實驗報告1

　　生物學是一門以實驗為基礎的自然科學，現代生物科學的發展尤其依賴科學實驗。在生物中，實驗、學習和觀察等實踐環節對我們掌握生物學知識、科學方法、培養我們的動手能力和形成科學素質都起到了至關重要的作用。正是因此，從我們開始接觸生物這門學科開始，就不斷有生物實驗課程，鍛煉我們各式各樣的能力。

　　但是，也的確是上過各式各樣的生物實驗課，我才更加深刻的感受到這次做的現代生物技術綜合實驗對我的影響有多大。

　　老師在第一次課上，對我們詳盡的講解了我們此學期需要完成的一系列實驗。其中全是環環相扣，嵌合緊密，有點一招即失，滿盤皆輸的壓力，不過我們更多的是懷著一種躍躍欲試的激動，恨不得立馬動手，靠著自己學來的知識，認真的完成這套實驗，并且還能看到最終那令人欣喜的結果。就這么妄想著妄想著，我們從第二周開始的現代生物技術綜合實驗的漫長旅程。

　　由于，老師沒有硬性的要求實驗時間，我們便是一有空閑就往實驗室里鉆，也就少了以前實驗課上出現的，因為部分實驗儀器的數量缺少，同學們每次做實驗都是你推我嚷的，造成了實驗興趣的流失。以至于做實驗的態度越來越渙散，甚至只是簡單的走下過場而已，幾次實驗課下來，熱情全無。但按照金老師的提議來，大家來實驗的時間不同，使得對儀器使用的時間錯開，減少了為爭搶儀器或是藥品而嘈雜不堪的場面，實驗也變得順利了許多。

　　金老師會很體諒一些先開始忙活的同學，在黑板上寫清他們實驗大概會做到的步驟和注意事項，后面實驗的準備物品和要求，然后開始在忙于實驗而奔走中的同學之間晃悠。觀察我們的實驗操作，或是時不時提點解釋一下我們實驗步驟的緣由；實驗藥品的作用；如何做會得到更好的結果；實驗沒有得到好的結果或是做的失敗了的原因。可是，隨著實驗的發展，后來更多的時候，是我們在看過書本上要求的實驗步驟后，去纏著金老師，圍在他周圍，問他關于實驗的各種問題，就算同樣的問題被問過許多次，金老師依然是和藹的笑著一一解答我們的疑問，他的平易近人，他的悉心教導，他的不驕不躁，他的耐性與笑容都深深的打動了實驗中的每位同學。

　　其實，他的這種教學方式，亮點就在于此，自主實驗迫使我們會仔細品味步驟中的點滴；實驗過程中的出現的各種問題，就要求我們會去思考如何排除，繼續實驗；實驗結果的不理想，更是強迫我們能認真回顧實驗中的任何細節，找出問題所在，也會需要我們去深入了解這步實驗的機理，用藥品的理由，實驗操作要求等。這些自己通過自己動手動腦而逐步累積起來的經驗，是在以往任何時候都沒有獲得過的，那時，只知道按照老師和書本上寫的步驟來，根本不在意為什么要這么做，于是少了對實驗的探究，能學到的東西自然也減少。

　　說完對金老師和老師方式的看法，其次我想談談，我在這樣的教學指導下獲得的收獲。

　　我是一個很懶散的人，以前做實驗，大部分都是照本宣科，很少動腦筋去思考實驗的前因后果，對臺上老師的講解也都是一知半解的混著。但是，這次實驗著實讓我很費了一番腦子，有深入的去了解個中原理，實驗操作的機理，儀器的.使用方法，幫助我糾正和熟練許多操作，同時讓我認識到自己以前的迷糊與不負責任，也讓我體會到全身心的投入到一件事中，是如此快樂和滿足，還得到了好多在課堂上永遠無法獲得的知識。下面，具體說說看我的幾件不小的收獲。

　　第一件，混實驗室久了，我有了可以“變出”任何大家想要的器皿的“功能”，只要是實驗室里有的且我們熟知的物品（老師打包裝起來的不算），無論是藥品試劑，還是不同規格的量筒試管，我都可以摸出來，省去了四處找老師尋求幫助的時間和氣力。

　　第二件，學會了配置許多的試劑，于是知道了不同的試劑配置需要注意的問題，鞏固了某些藥品相關的知識，并且在多次配置時，得出了一個結論：如果不是很熟悉的試劑配方，最好是拿一個專門的本子記錄下來，以備不時之需，這樣一來，以后實驗也不會因為試劑的問題而手忙腳亂。

　　第三件，實驗步驟需要仔細的斟酌其中的奧秘，每一步如此走，自然有前人的用意，畢竟這些實驗都是過去的科學家研究出來的精華繼承，理解了他們的意圖和原由，做起實驗來會更加的得心應手也不易遺忘或出錯。

　　第四件，這件是我最大的心得，也不全是從此次實驗中得來，且也不是只能運用于做實驗中，這份心得是：在決定要做的事情后，最好考慮清楚行動時會需要用些什么，做些什么，將準備工作做好，為后續行動鋪墊，按其規律列好清單，會使得實驗或者任何別的事情做得更加順利，有條理，排除做過多無用功的可能性，提高了效率的同時還降低錯誤失誤的出現概率，成功率也會增高。

　　以上是我這個學期里，從現代生物技術綜合實驗里得到的一些心得。我希望在下個學期里，我能將自己從這里得到的心得，學習應用到其他的實驗甚至是學習生活中去，擴充自己的知識，拓寬自己的視野，增厚自己的底蘊，加強自己的能力，不敢放言稱自己要成為未來生物界中的一流人才，只能勉勵自己成為一個不負眾望的有用的人。

生物實驗報告2

　　實驗一觀察DNA和RNA在細胞中的分布

　　實驗原理：DNA綠色，RNA紅色

　　分布：真核生物DNA主要分布在細胞核中，線粒體和葉綠體內也含有少量的DNA;RNA主要分布在細胞質中。

　　實驗結果：細胞核呈綠色，細胞質呈紅色。

　　實驗二物質鑒定

　　還原糖+斐林試劑磚紅色沉淀

　　脂肪+蘇丹III橘黃色

　　脂肪+蘇丹IV紅色

　　蛋白質+雙縮脲試劑紫色反應

　　1、還原糖的檢測

　　(1)材料的選取：還原糖含量高，白色或近于白色，如蘋果，梨，白蘿卜。

　　(2)試劑：斐林試劑(甲液：0.1g/mL的NaOH溶液，乙液：0.05g/mL的CuSO4溶液)，現配現用。

　　(3)步驟：取樣液2mL于試管中→加入剛配的斐林試劑1mL(斐林試劑甲液和乙液等量混合均勻后再加入)→水浴加熱2min左右→觀察顏色變化(白色→淺藍色→磚紅色)

　　★模擬尿糖的檢測

　　1、取樣：正常人的尿液和糖尿病患者的尿液

　　2、檢測方法：斐林試劑(水浴加熱)或班氏試劑或尿糖試紙

　　3、結果：(用斐林試劑檢測)試管內發生出現磚紅色沉淀的是糖尿病患者的尿液，未出現磚紅色沉淀的是正常人的尿液。

　　4、分析：因為糖尿病患者的尿液中含有還原糖，與斐林試劑發生反應產生磚紅色沉淀，而正常人尿液中無還原糖，所以沒有發生反應。

　　2、脂肪的檢測

　　(1)材料的選取：含脂肪量越高的組織越好，如花生的子葉。

　　(2)步驟：制作切片(切片越薄越好)將最薄的花生切片放在載玻片中央

　　染色(滴蘇丹Ⅲ染液2～3滴切片上→2～3min后吸去染液→滴體積分數50%的酒精洗去浮色→吸去多余的酒精)

　　制作裝片(滴1～2滴清水于材料切片上→蓋上蓋玻片)

　　鏡檢鑒定(顯微鏡對光→低倍鏡觀察→高倍鏡觀察染成橘黃色的脂肪顆粒)

　　3、蛋白質的檢測

　　(1)試劑：雙縮脲試劑(A液：0.1g/mL的NaOH溶液，B液：0.01g/mL的CuSO4溶液)

　　(2)步驟：試管中加樣液2mL→加雙縮脲試劑A液1mL，搖勻→加雙縮尿試劑B液4滴，搖勻→觀察顏色變化(紫色)

　　考點提示：

　　(1)常見還原性糖與非還原性糖有哪些?

　　葡萄糖、果糖、麥芽糖都是還原性糖;淀粉、蔗糖、纖維素都是非還原性糖。

　　(2)還原性糖植物組織取材條件?

　　含糖量較高、顏色為白色或近于白色，如：蘋果、梨、白色甘藍葉、白蘿卜等。

　　(3)研磨中為何要加石英砂?不加石英砂對實驗有何影響?

　　加石英砂是為了使研磨更充分。不加石英砂會使組織樣液中還原性糖減少，使鑒定時溶液顏色變化不明顯。

　　(4)斐林試劑甲、乙兩液的使用方法?混合的目的?為何要現混現用?

　　混合后使用;產生氫氧化銅;氫氧化銅不穩定。

　　(5)還原性糖中加入斐林試劑后，溶液顏色變化的順序為：淺藍色棕色磚紅色

　　(6)花生種子切片為何要薄?只有很薄的切片，才能透光，而用于顯微鏡的觀察。

　　(7)轉動細準焦螺旋時，若花生切片的細胞總有一部分清晰，另一部分模糊，其原因一般是什么?切片的厚薄不均勻。

　　(8)脂肪鑒定中乙醇作用?洗去浮色。

　　(9)雙縮脲試劑A、B兩液是否混合后用?先加A液的目的。怎樣通過對比看顏色變化?

　　不能混合;先加A液的目的是使溶液呈堿性;先留出一些大豆組織樣液做對比。

　　實驗三觀察葉綠體和細胞質流動

　　1、材料：新鮮蘚類葉、黑藻葉或菠菜葉，口腔上皮細胞臨時裝片

　　2、原理：葉綠體在顯微鏡下觀察，綠色，球形或橢球形。

　　用健那綠染液染色后的口腔上皮細胞中線粒體成藍綠色，細胞質接近無色。

　　知識概要：

　　取材制片低倍觀察高倍觀察

　　考點提示：

　　(1)為什么可直接取用蘚類的小葉，而不能直接取用菠菜葉?

　　因為蘚類的小葉很薄，只有一層細胞組成，而菠菜葉由很多層細胞構成。

　　(2)取用菠菜葉的下表皮時，為何要稍帶些葉肉?

　　表皮細胞除保衛細胞外，一般不含葉綠體，而葉肉細胞含較多的葉綠體。

　　(3)怎樣加快黑藻細胞質的流動速度?最適溫度是多少?進行光照、提高水溫、切傷部分葉片;25℃左右。

　　(4)對黑藻什么部位的細胞觀察，所觀察到的細胞質流動的現象最明顯?葉脈附近的細胞。

　　(5)若視野中某細胞中細胞質的流動方向為順時針，則在裝片中該細胞的細胞質的實際流動方向是怎樣的?仍為順時針。

　　(6)是否一般細胞的細胞質不流動，只有黑藻等少數植物的細胞質才流動?

　　否，活細胞的細胞質都是流動的。

　　(7)若觀察植物根毛細胞細胞質的流動，則對顯微鏡的視野亮度應如何調節?

　　視野應適當調暗一些，可用反光鏡的平面鏡來采光或縮小光圈。

　　(8)在強光照射下，葉綠體的向光面有何變化?葉綠體的受光面積較小有一面面向光源實驗四觀察有絲分裂。

　　1、材料：洋蔥根尖(蔥，蒜)

　　2、步驟：

　　(一)洋蔥根尖的培養

　　(二)裝片的制作

　　制作流程：解離→漂洗→染色→制片

　　1.解離：藥液：質量分數為15%的.鹽酸，體積分數為95%的酒精(1：1混合液)。時間：3~5min.目的：使組織中的細胞相互分離開來。

　　2.漂洗：用清水漂洗約10min.目的：洗去藥液，防止解離過度，并有利于染色。

　　3.染色：用質量濃度為0.01g/mL或0.02g/mL的龍膽紫溶液(或醋酸洋紅液)染色3~5min。目的：使染色體著色，利于觀察。

　　4.制片：將根尖放在載玻片上，加一滴清水，并用鑷子把根尖弄碎，蓋上蓋玻片，在蓋玻片上再加一片載玻片。然后用拇指輕輕地按壓載玻片。目的：使細胞分散開來，有利于觀察。

　　(三)觀察

　　1、先在低倍鏡下找到根尖分生區細胞：細胞呈正方形，排列緊密，有的細胞正在分裂。

　　2、換高倍鏡下觀察：分裂中期→分裂前、后、末期→分裂間期。(注意各時期細胞內染色體形態和分布的特點)。其中，處于分裂間期的細胞數目最多。

　　考點提示：

　　(1)培養根尖時，為何要經常換水?增加水中的氧氣，防止根進行無氧呼吸造成根的腐爛。

　　(2)培養根尖時，應選用老洋蔥還是新洋蔥?為什么?應選用舊洋蔥，因為新洋蔥尚在休眠，不易生根。

　　(3)為何每條根只能用根尖?取根尖的時間是何時?為何?

　　因為根尖分生區的細胞能進行有絲分裂;上午10時到下午2時;因為此時細胞分裂活躍。

　　(4)解離和壓片的目的分別是什么?壓片時為何要再加一塊載玻片?解離是為了使細胞相互分離開來，壓片是為了使細胞相互分散開來;再加一塊載玻片是為了受力均勻，防止蓋玻片被壓破。

　　(5)若所觀察的組織細胞大多是破碎而不完整的，其原因是什么?壓片時用力過大。

　　(6)解離過程中鹽酸的作用是什么?丙酮可代替嗎?分解和溶解細胞間質;不能，而硝酸可代替。

　　(7)為何要漂洗?洗去鹽酸便于染色。

　　(8)細胞中染色最深的結構是什么?染色最深的結構是染色質或染色體。

　　(9)若所觀察的細胞各部分全是紫色，其原因是什么?

　　染液濃度過大或染色時間過長。

　　(10)為何要找分生區?分生區的特點是什么?能用高倍物鏡找分生區嗎?為什么?

　　因為在根尖只有分生區的細胞能夠進行細胞分裂;分生區的特點是：細胞呈正方形，排列緊密，有的細胞處于分裂狀態;不能用高倍鏡找分生區，因為高倍鏡所觀察的實際范圍很小，難以發現分生區。

　　(11)分生區細胞中，什么時期的細胞最多?為什么?間期;因為在細胞周期中，間期時間最長。

　　(12)所觀察的細胞能從中期變化到后期嗎?為什么?

　　不能，因為所觀察的細胞都是停留在某一時期的死細胞。

　　(13)觀察洋蔥表皮細胞能否看到染色體?為什么?不能，因為洋蔥表皮細胞一般不分裂。

　　(14)若觀察時不能看到染色體，其原因是什么?

　　沒有找到分生區細胞;沒有找到處于分裂期的細胞;染液過稀;染色時間過短。

生物實驗報告3

　　實驗日期： 年月 日

　　組長： 組員：

　　一、實驗要求

　　1、練習使用顯微鏡，學習規范的操作方法。

　　2、能夠獨立操作顯微鏡。

　　3、能夠將玻片標本移動到視野中央，并看到清晰的圖像。

　　二、實驗原理

　　三、材料用具

　　顯微鏡，寫有“上”字的玻片，動物、植物玻片標本，擦鏡紙，紗布。

　　四、方法與步驟

　　（一）取鏡和安放

　　1、右手握住鏡臂，左手托住鏡座

　　2、把顯微鏡放在實驗臺上，略偏左。安裝好目鏡和物鏡。

　　（二）對光

　　3、轉動轉換器，使低倍物鏡對準通光孔（物鏡的'前端與載物臺要保持2厘米的距離）。

　　4、把一個較大的光圈對準通光孔。左眼注視目鏡內（右眼睜開，便于以后同時畫圖）。轉動反光鏡，使光線通過通光孔反射到鏡筒內。通過目鏡，以看到白亮的視野。

　　（三）觀察

　　5、把所要觀察的玻片標本（也可以用印有“e”字的薄紙片制成）放在載物臺上，用壓片夾壓住，標本要正對通光孔的中心。

　　6、轉動粗準焦螺旋，使鏡筒緩緩下降，直到物鏡接近玻片標本為止（眼睛看著物鏡，以免物鏡碰到玻片標本）。

　　7、左眼向目鏡內看，同時反方向轉動粗準焦螺旋，使鏡筒緩緩上升，直到看清物像為止。再略微轉動細準焦螺旋，使看到的物像更加清晰。

　　注意事項：

　　1、實驗完畢，把顯微鏡的外表擦拭干凈。轉動轉換器，把兩個物鏡偏到峽谷旁。最后把顯微鏡放進鏡箱里，

生物實驗報告4

　　質粒DNA的提取、純化及檢測

　　姓名：XXX學號：2011001400XX年級：20xx級生物基地班 實驗日期：20xx年9月16日—30日組別：6組 同組者：XX

　　一、【實驗目的】

　　1、掌握堿變性提取法提取大腸桿菌中質粒DNA的原理和方法。

　　2、學習并掌握凝膠電泳進行DNA的分離純化的實驗原理。

　　3、學習并掌握凝膠的制備及電泳方法。

　　4、學習并掌握凝膠中DNA的分離純化方法。

　　二、【實驗原理】

　　1、質粒DNA的制備方法

　　質粒（Plasmid）是獨立存在于染色體外、能自主復制并能穩定遺傳的一種環狀雙鏈DNA分子，分布于細菌、放線菌、真菌以及一些動植物細胞中，但在細菌細胞中含量最多。細菌質粒大小介于1～200Kb之間，是應用最多的質粒類群，在細菌細胞內它們利用宿主細胞的復制機構合成質粒自身的DNA。

　　質粒DNA的制備包括3個步驟：①培養細菌，使質粒DNA大量擴增；②收集和裂解細菌；③分離和純化質粒DNA。主要方法包括：堿裂解法：0。2molNaOH+1%SDS；煮沸裂解法：沸水煮沸40秒；SDS裂解法：10%SDS，一般用于質粒大量提取。在實際操作中可以根據宿主菌株類型、質粒分子大小、堿基組成和結構等特點以及質粒DNA的用途進行選擇。本實驗選擇堿裂解法提取質粒DNA。

　　2、質粒DNA的提取——堿變性提取法

　　在細菌細胞中，染色體DNA和質粒DNA均被釋放出來，但是兩者變性與復性所依賴的溶pH值不同。在pH值高達12。0的堿性溶液中，染色體DNA的氫鍵斷裂，雙螺旋結構解開而變性；共價閉合環狀質粒DNA的大部分氫鍵斷裂，但兩條互補鏈不完全分離。因為它們在拓撲學上是相互纏繞的。當用pH值4。6的KAc（NaAc）高鹽溶液調節堿性溶液至中性時，變性的質粒DNA可恢復原來的共價閉合環狀超螺旋結構而溶解于溶液中；但染色體DNA不能復性，而是與不穩定的大分子RNA、蛋白質—SDS復合物等一起形成纏連的、可見的白色絮狀沉淀。這種沉淀通過離心，與復性的溶于溶液的質粒DNA分離。溶于上清液的質粒DNA，可用無水乙醇和鹽溶液，使之凝聚而形成沉淀。由于DNA和RNA性質類似，乙醇沉淀

　　DNA的同時，也伴隨著RNA沉淀，可利用RNaseA將RNA降解。質粒DNA溶液中的RNaseA以及一些可溶性蛋白，可通過酚/氯仿抽提除去，最后獲得純度較高的質粒DNA。

　　3、凝膠電泳進行DNA分離純化

　　電泳（electrophoresis）是帶電物質在電場中向著與其電荷相反的電極方向移動的現象。各種生物大分子在一定pH條件下，可以解離成帶電荷的離子，在電場中會向相反的電極移動。凝膠是支持電泳介質，它具有分子篩效應。含有電解液的凝膠在電場中，其中的電離子會發生移動，移動的速度可因電離子的大小形態及電荷量的不同而有差異。利用移動速度差異，就可以區別各種大小不同的分子。因而，凝膠電泳可用于分離、鑒定和純化DNA的片段，是分子生物學的核心技術之一。

　　凝膠電泳技術操作簡單而迅速，分辨率高，分辨范圍廣。此外，凝膠中DNA的位置可以用低濃度熒光插入染料如溴化乙錠（ethidium bromide，EB）或SYBR Gold染色直接觀察到，甚至含量少至20pg的雙鏈DNA在紫外激發下也能直接檢測到。需要的話，這些分離的DNA條帶可以從凝膠中回收，用于各種各樣目的的實驗。

　　分子生物學中，常用的兩種凝膠為瓊脂糖（agarose）和聚丙烯酰胺凝膠。這兩種凝膠能灌制成各種形狀、大小和孔徑，也能以許多不同的構型和方位進行電泳。聚丙烯酰胺凝膠分辨率高，使用于較小分子核酸（5—500bp）的分離和蛋白質電泳。它的分辨率非常高，長度上相差1bp或質量上相差0。1%的DNA都可以彼此分離，這也是采用聚丙烯酰胺凝膠電泳進行DNA序列分析的分子基礎。雖然它能很快地進行電泳，并能容納較大的DNA上樣量，但是與瓊脂糖凝膠相比，在制備和操作上繁瑣。瓊脂糖是從海藻中提取的長鏈狀多聚物，由β—D—吡喃半乳糖與3，6—脫水—L—吡喃半乳糖組成，相對分子質量為104—105。瓊脂糖加熱至90℃左右，即可溶化形成清亮、透明的液體，澆在模版上冷卻后形成凝膠，其凝固點為40—45℃。瓊脂糖凝膠相對于聚丙烯酰胺凝膠分辨率低，但它的分離范圍更大（50至百萬bp），小片段DNA（50—20000bp）最適合在恒定輕度和方向的電場中水平方向的瓊脂糖凝膠內電泳分離。瓊脂糖凝膠電泳易于操作，適用于核酸電泳，測定DNA的相對分子質量，分離經限制酶水解的DNA的片段，進一步純化DNA等。

　　瓊脂糖凝膠電泳是一種常用的方法。在溶液中，由于核酸有磷酸基而帶有負電荷，在電場中向正極移動。DNA在瓊脂糖凝膠中的電泳遷移率主要取決于6個因素：樣品DNA分子的`大小、DNA分子的構象、瓊脂糖濃度、電泳所用電場、緩沖液和溫度。

　　三、【實驗材料】

　　1、實驗儀器

　　培養皿、接種環、三角瓶、酒精燈、恒溫振蕩培養箱、50ml離心管、1。5ml塑料離心管（Eppendorf管）、高速離心機、漩渦振蕩器、微量移液器、不同型號槍頭、天平、制膠槽、梳子、電泳儀、吸管、量筒、微波爐、滅菌鍋、恒溫水浴鍋、試劑瓶、衛生紙和記號筆、手套等。

　　2、實驗試劑

　　LB培養基，抗生素Ap（氨芐青霉素），溶液Ⅰ，溶液Ⅱ，溶液Ⅲ，RNaseA母液，TE緩沖液，飽和酚，氯仿/異戊醇混合液，酚/氯仿/異戊醇（PCI）混合液，預冷無水乙醇，TAE電泳緩沖液（10×），上樣緩沖液（6×），瓊脂糖，溴化乙錠（EB），DNA相對分子質量標準物DNA Marker λ/Hind Ⅲ，5mol/L pH 5。2的醋酸鈉。

　　四、【實驗步驟】

　　1、準備實驗

　　配制LB液體培養基，分裝到100ml的三角瓶中20ml，300ml的三角瓶中50ml，另配LB固體培養基；準備1000ul、200ul、10ul移液槍尖各一盒，1。5ml離心管若干于500ml三角瓶中，50ml離心管2個 ，將上述物品包好連同配好的培養基一同滅菌。

　　2、菌體培養

　　在含有Ap的LB平板上挑取一環攜帶有質粒pUC19的E。coli DH5單菌落，接種于20mlLB液體培養基中進行37℃振蕩過夜培養，培養基中加Ap100ul

　　（100ug/ml），質粒pUC19具有Ap抗性基因，使得帶有pUC19的質粒得以生長。 過夜培養后菌體量大，雜質較多，然后用移液槍吸取過夜培養物2ml轉接于50mlLB液體培養基中，培養基中加入Ap250ul，37℃振蕩培養4—6h至對數生長期后期，生長速率快，代謝旺盛，酶系活躍，雜質少，適合提取質粒。

　　3、質粒提取

　　（1）稱量空的50ml離心管的重量為14。331g，然后將三角瓶中的菌液倒至管中，不能倒滿，液面距管口約1cm，7000rpm離心5分鐘后棄去上清液，收集菌體細胞。

　　（2）向離心管中懸滴加入5ml冰預冷的溶液Ⅰ打散菌體洗滌，用漩渦振蕩器使之充分懸浮后用槍尖吹吸混勻，同步驟（1）離心，棄去上清，將離心管倒置于吸水紙上，使上清液全部流盡干燥，然后稱重得14。437g，則菌體質量為106mg。

　　（3）洗滌后每100mg菌體應加入冰預冷的溶液Ⅰ1ml，106mg菌體按100mg菌體處理，加入溶液Ⅰ1ml，打散菌泥、吹吸混勻，冰浴5min。溶液Ⅰ中的葡萄糖使

　　溶液密度增加，懸浮后的大腸桿菌不會快速沉積到管子的底部；維持滲透壓，防止細胞提前破裂，防止DNA受機械剪切力作用而降解。EDTA是Ca2+和Mg2+等二價金屬離子的螯合劑，可抑制DNase的活性，抑制微生物的生長。Tris—Cl溶液提供適當的pH。

　　（4） 按比例加入新配制的溶液Ⅱ2ml（與溶液Ⅰ對應），輕加輕搖，冰浴5min。溶液變清亮透明粘稠如蛋清狀。溶液Ⅱ中的NaOH使細胞膜發生了從bilayer（雙層膜）結構向micelle（微囊）結構的相變化導致細胞溶解。同時，強堿性使染色體DNA、質粒DNA和蛋白質變性；SDS為下一步沉淀做鋪墊。

　　（5）按比例加入冰預冷的溶液Ⅲ1。5ml（與溶液Ⅰ、Ⅱ對應），輕加輕搖，冰浴10min。溶液出現白色絮狀沉淀。沉淀為蛋白質SDS復合物、細胞碎片和其他大分子成分。溶液Ⅲ中的HAc中和NaOH，因為長時間的堿性條件會打斷基因組DNA，只要是50－100 kb大小的片斷，就不能再被PDS共沉淀。同時變性的質粒DNA復性。反應形成的高鹽環境進一步加速了沉淀。

　　（6）12000rpm離心15min，白色沉淀聚集在離心管一側，用移液槍將上清液轉移到另一潔凈的離心管中。然后向上清液中加入1/10體積的3MNaAc混勻，加入2倍體積的冰無水乙醇，混勻，—20℃下沉降30分鐘。乙醇可以任意比和水相混溶，乙醇與核酸不會起任何化學反應，對DNA很安全，因此是理想的沉淀劑。 DNA溶液是DNA以水合狀態穩定存在，當加入乙醇時，乙醇會奪去DNA周圍的水分子，使DNA失水而易于聚合。在pH為8左右的溶液中，DNA分子是帶負電荷的，加一定濃度的NaAc或NaCl，易于互相聚合而形成DNA鈉鹽沉淀。

　　（7） 以12000rpm離心15min，小心倒去上清液，得到DNA沉淀。加入3ml70%冰乙醇，輕輕地覆蓋沉淀，不打散沉淀，洗滌一次。

　　（8）以12000rpm離心5min，離心管底部DNA沉淀所在面應與收集沉淀面一致。去掉上清液，將離心管上沉淀部位做好標記，將離心管倒置于吸水紙上，干燥5min。粗提取的質粒呈淺黃色，隨著水分的減少質粒變為無色。所以為了完全溶解質粒，要在離心管上標記質粒所在位置。

　　（9）將DNA沉淀溶于1mlTE緩沖液中，移液槍吹吸助溶，然后將溶解液轉移到一個Eppendorf管中。TE是pH緩沖液，為DNA提供穩定的生理狀態，呈弱堿性，有利于保護堿基對。同時含有EDTA是二價陽離子的螯合劑，抑制DNA酶作用。

　　4、質粒純化

　　（1）Eppendorf管中加入RNase A（純濃度＞50ug/ml），37℃保溫0。5—1h

　　（2）將上述的溶液平均分配到2個1。5ml的微量離心管中，每管0。5ml，分別加入與溶液等體積的（500ul）Tris飽和苯酚溶液，振蕩混勻，7000rpm，離心5min，上清液轉移到一潔凈的Eppendorf管中。苯酚是經Tris飽和后的，顯黃色。苯

　　酚加入后，溶液分層，苯酚向下，下層呈淺黃色，上層溶液無色，在中間產生大量白色沉淀，此為變性后的蛋白質。

　　（3）加入等體積的（500ul）苯酚/氯仿溶液（1：1），振蕩混勻， 7000rpm，離心5min，上清液轉移到到另一潔凈的Eppendorf管中。苯酚是強的蛋白變性劑，但是苯酚留在質粒溶液中會影響DNA的酶切，它本身易被氧化，會損傷質粒。氯仿也是蛋白變性劑，但是比酚弱，且能溶解質粒中的脂類，溶解苯酚，去除溶液中的苯酚。異戊醇則可起消除抽提過程中出現的泡沫，有利于分層更明顯。此時溶液中已看不到明顯的白色沉淀，但仍有蛋白質的存在。

　　（4）加入等體積的氯仿溶液，振蕩混勻， 7000rpm，離心5min，上清液轉移到一潔凈的Eppendorf管中，得上清液400ul。

　　（5）向上清液中加入1/10體積的NaAc混勻，再加入2倍體積的冰無水乙醇，混勻，—20℃下沉降30分鐘。

　　（6）以12000rpm，離心15min，棄去上清液，得到DNA沉淀，為白色。

　　（7）向DNA沉淀中加入70%冰乙醇200ul，不打散沉淀，洗滌。然后以12000rpm離心5min，離心管底部DNA沉淀所在面應與收集沉淀面一致。

　　（8）去掉上清液，將離心管倒置于吸水紙上，室溫干燥。用50ulTE溶解于1管中。

　　5、質粒檢測

　　（1）稱取0。4g的瓊脂糖，置于一錐形瓶中，在三角瓶上標好液面位置，加入40ml的1×TAE電泳緩沖液，再加入5—10ml重蒸水，以補充在溶膠過程中損失的水分。然后置微波爐加熱至完全溶化，溶液透明。冷卻至50℃左右，倒入制板槽制板。

　　（2）待膠凝固后，小心拔起梳子，使加樣孔端置陰極段放進電泳槽內。在槽內加入1×TAE 電泳緩沖液，至液面覆蓋過膠面2—3cm。取1μl加電泳載樣液和3μl質粒樣品于小紙片上，用移液槍混勻。

　　（3）電泳1h，觀察溴酚蘭的帶（藍色）的移動。

　　（4） 把膠槽取出，小心滑出膠塊，放進EB溶液中進行染色，完全浸泡約5min。

　　（5）凝膠成像儀觀察。

　　五、【注意事項】

　　（1）滴加溶液II時，要逐滴加入，且要輕加輕搖溶液使之混勻，整體動作要快，因為強堿在溶液中停留時間不能過長，否則會破壞質粒DNA。

　　（2）加入溶液III后，生成了大量的絮狀沉淀，溶液III中和強堿使質粒復性，不可劇烈震蕩， 防止染色體DNA斷裂，應該上下顛倒離心管，使其混勻。

生物實驗報告5

　　一、實驗目的：

　　1、學會如何使用顯微鏡觀察細胞；

　　2、了解細胞的結構；

　　3、學會制作臨時裝片。

　　二、實驗材料：（實驗材料可換）松針、動物血液、動物神經細胞永久裝片

　　三、實驗用具： 載玻片、蓋玻片、蒸餾水、滴管、鑷子、土豆、刀片、顯微鏡（物鏡5X、10X、40X）

　　四、方法步驟：

　　1、制作松針的臨時切片：

　　（1）取干凈的載玻片一個平置于試驗臺上，用滴管在載玻片中央滴一滴蒸餾水。

　　（2）將土豆切成條狀（截面約：0.5X0.5cm)取兩條，將一根松針夾在兩個土豆條之間，用刀片削成盡量薄的薄片，削時，手腕不動，靠大臂帶動小臂移動刀片。切片數次。從中選取較薄的切片，置于載玻片的.水滴上。

　　（3）從一側輕輕蓋上蓋玻片，不要產生氣泡。用吸水紙輕輕吸去蓋玻片周圍的水滴，即完成臨時切片的制作。

　　2、觀察切片：

　　（1）取出顯微鏡，置于試驗臺上靠左的位置，打開光源。

　　（2) 將上步制作好的切片置于顯微鏡的載物臺上，調整載物臺位置，使蓋玻片對準光源。

　　（3）使用5X物鏡觀察切片，使松針切片在視野中心，換成10X物鏡，觀察松針葉面橫切結構。

　　（4）換成40X物鏡觀察，注意細胞及細胞內物質結構，畫圖。

　　3、動物血液臨時裝片的制作及觀察（除了不用切片，其他類似）

　　4、 動物神經細胞永久裝片的觀察。

　　五、反思：

　　1、松針的葉面結構是什么樣的？

　　2、動物細胞的結構是什么樣的？與植物細胞又什么不同？

　　3、顯微鏡的物鏡倍數愈大，視野的亮度如何？物體的大小如何？

　　4、如何調節焦距？

　　5、如何才能使切片盡量的薄？切片的厚薄對顯微鏡下觀察的效果有什么影響。

生物實驗報告6

　　一、實驗目的：

　　1、通過對原核和真核各種形態細胞的光學顯微鏡觀察，了解細胞的形態及其顯微結構；

　　2、學習顯微測量的方法，對細胞的大小有一直觀認識。

　　二、實驗材料和儀器：

　　小白鼠肝細胞切片；雞血紅細胞；蠶豆葉片橫切片；

　　普通光學顯微鏡；目鏡測微尺；鏡臺測微尺；載玻片；蓋玻片。

　　三、實驗步驟：

　　(一)細胞形態觀察

　　l、動物細胞的觀察

　　（1）人肝細胞切片：在顯微鏡下仔細觀察肝細胞的形態構造。

　　（2）雞血細胞涂片的觀察：觀察血細胞的組成；紅細胞、白細胞、血小板的形態特點。

　　2、植物細胞的觀察

　　取蠶豆葉片橫切片的觀察：注意表皮細胞和葉肉細胞的基本結構。

　　（二）細胞的大小和測量

　　1、卸下目鏡的上透鏡，將目鏡測微尺刻度向下裝在目鏡的'焦平面上，再旋上目鏡的上透鏡。

　　2、將鏡臺測微尺刻度向上放在鏡臺上夾好，使測微尺分度位于視野中央。調焦至能看清鏡臺測微尺的分度。

　　3、小心移動鏡臺測微尺和轉動目鏡測微尺(如目鏡測微尺分度模糊，可轉動目鏡上透鏡進行調焦)，使兩尺左邊的一直線重合，然后由左向右找出兩尺另一次重合的直線。

　　4、記錄兩條重合線間目鏡測微尺和鏡臺測微尺的格數。按下式計算目鏡測微尺每格等于多少μm：

　　鏡臺測微尺的格數

　　目鏡測微尺每格的微米數=————————— × 10

　　目鏡測微尺的格數

　　四、實驗結果：

　　1、目鏡校正：40倍顯微鏡目鏡測微尺每格的微米數=17/70=0.24

　　2、細胞大小的測量：

　　五、作業與思考：

　　1、血細胞按含量高低，主要含有：紅細胞，白細胞，血小板。

　　白細胞最大，紅細胞次之，血小板最小。紅細胞：主要的功能是運送氧。 白細胞：主要扮演了免疫的角色，當病菌侵入人體時，白細胞能穿過毛細血管壁，集中到病菌入侵部位，將病菌包圍，吞噬。血小板：止血過程中起著重要作用。細胞形態見下圖。

　　2、植物細胞一般比動物細胞大一些。形態圖見下。

　　3、在不同放大倍數下，測定的細胞大小基本一致，但有一些偏差。放大倍數越大，在視野中同等實際距離下的兩點視野距離更大，而更容易測量準確。

生物實驗報告7

　　實驗五比較酶和Fe3+的催化效率

　　考點提示：

　　(1)為何要選新鮮的肝臟?因為在不新鮮的肝臟中，過氧化氫酶的活性會由于細菌的破壞而降低。

　　(2)該實驗中所用試管應選較粗的還是較細的?為什么?應選用較粗的，因為在較細的試管中容易形成大量的氣泡，而影響衛生香的復燃。

　　(3)為何要選動物的肝臟組織來做實驗，其他動植物的組織的研磨液能替代嗎?因為肝臟組織中過氧化氫酶含量較豐富;其它動植物組織也含有少量的過氧化氫酶，所以能夠替代。

　　(4)相同質量的塊狀肝臟和肝臟研磨液，哪一個催化效果好?為什么?研磨液效果好;因為它增加過氧化氫酶與過氧化氫的接觸面積。

　　(5)滴入肝臟研磨液和氯化鐵溶液時，可否共用下個吸管?為什么?不可共用，防止過氧化氫酶與氯化鐵混合，而影響實驗效果。

　　實驗六色素的提取和分離

　　1、原理：葉綠體中的色素能溶解在有機溶劑丙酮或無水乙醇——提取色素

　　各色素在層析液中的溶解度不同，隨層析液在濾紙上擴散速度不同——分離色素

　　2、步驟：

　　(1)提取色素研磨

　　(2)制備濾紙條

　　(3)畫濾液細線：均勻，直，細，重復若干次

　　(4)分離色素：不能讓濾液細線觸及層析液

　　(5)觀察和記錄：結果濾紙條上從上到下依次為：橙黃色(胡蘿卜素)、黃色(葉黃素)、藍綠色(葉綠素a)、黃綠色(葉綠素b)。

　　考點提示：

　　(1)對葉片的要求?為何要去掉葉柄和粗的時脈?綠色、是深綠色。因為葉柄和葉脈中所含色素很少。

　　(2)二氧化硅的作用?不加二氧化硅對實驗有何影響?

　　為了使研磨充分。不加二氧化硅，會使濾液和色素帶的顏色變淺。

　　(3)丙酮的作用?它可用什么來替代?用水能替代嗎?

　　溶解色素。它可用酒精等有機溶劑來代替，但不能用水來代替，因為色素不溶于水。

　　(4)碳酸鈣的作用?不加碳酸鈣對實驗有何影響?

　　保護色素，防止在研磨時葉綠體中的色素受到破壞。不加碳酸鈣，濾液會變成黃綠色或褐色。

　　(5)研磨為何要迅速?要充分?過濾時為何用布不用濾紙?研磨迅速，是為了防止丙酮大量揮發;只有充分研磨，才能使大量色素溶解到丙酮中來。色素不能通過濾紙，但能通過尼龍布。

　　(6)濾紙條為何要剪去兩角?防止兩側層析液擴散過快。

　　(7)為何不能用鋼筆或圓珠筆畫線?因為鋼筆水或圓珠筆油中含有其它色素，會影響色素的分離結果。

　　(8)濾液細線為何要直?為何要重畫幾次?防止色素帶的重疊;增加色素量，使色素帶的顏色更深一些。

　　(9)濾液細線為何不能觸到層析液?防止色素溶解到層析液中。

　　(10)濾紙條上色素為何會分離?

　　由于不同的色素在層析液中的溶解度不同，因而它們隨層析液在濾紙條上的'擴散速度就不同。

　　(11)色素帶最寬的是什么色素?它在層析液中的溶解度比什么色素大一些?

　　最寬的色素帶是葉綠素a，它的溶解度比葉綠素b大一些。

　　(12)濾紙條上相互間距的是哪兩種色素?胡蘿卜素和葉黃素。

　　(13)色素帶最窄的是第幾條色素帶?為何?

　　第一條色素帶，因為胡蘿卜素在葉綠體的四種色素中含量最少。

　　實驗七觀察質壁分離和復原

　　1、條件：細胞內外溶液濃度差，活細胞，大液泡

　　2、材料：紫色洋蔥鱗片葉外表皮細胞(具紫色大液泡)，質量濃度0.3g/mL的蔗糖溶液，清水等。

　　3、步驟：制作洋蔥鱗片葉外表皮細胞臨時裝片→觀察→蓋玻片一側滴蔗糖溶液，另一側用吸水紙吸引→觀察(液泡由大到小，顏色由淺變深，原生質層與細胞壁分離)→蓋玻片一側滴清水，另一側用吸水紙吸引→觀察(質壁分離復原)

　　4、結論：細胞外溶液濃度>細胞內溶液濃度，細胞失水質壁分離

　　細胞外溶液濃度<細胞內溶液濃度，細胞吸水質壁分離復原

　　知識概要：制片觀察加液觀察加水觀察

　　考點提示：

　　(1)洋蔥為何要選紫色的?若紫色過淡怎么辦?

　　紫色的洋蔥有紫色的大液泡，便于觀察液泡的大小變化;縮小光圈，使視野變暗些。

　　(2)洋蔥表皮應撕還是削?為何?表皮應撕不能削，因為削的表皮往往太厚。

　　(3)植物細胞為何會出現質壁分離?動物細胞會嗎?當細胞失去水分時，其原生質層的伸縮性大于細胞壁的伸縮性;動物細胞不會發生質壁分離，因為動物細胞沒有細胞壁。

　　(4)質壁分離時，液泡大小和顏色的變化?復原時呢?

　　細胞發生質壁分離時，液泡變小，紫色加深;當細胞質壁分離復原時，液泡變大，紫色變淺。

　　(5)若發生質壁分離后的細胞，不能發生質壁分離復原，其原因是什么?

　　細胞已經死亡(可能是外界溶液濃度過大，細胞失水過多或質壁分離時間過長)

　　(6)高倍鏡使用前，裝片如何移動?

　　若要把視野中上方的物像移到視野的正中心，則要將裝片繼續向上移動。若要把視野中左方的物像移到視野的正中心，則要將裝片繼續向左方移動，因為顯微鏡視野中看到的是倒像。

　　(7)換高倍物鏡后，怎樣使物像清晰?視野明暗度會怎樣變化?如何調亮?換高倍物鏡后，應調節細準焦螺旋使物像變得清晰;視野會變暗，可調大光圈或改用反光鏡的凹面鏡來使視野變亮。

　　(8)所用目鏡、物鏡的長度與放大倍數的關系?目鏡越長，放大倍數越小;物鏡越長，放大倍數越大。

　　(9)物像清晰后，物鏡與載玻片之間的距離和放大倍數的關系?

　　物鏡與載玻片之間的距離越小，放大倍數越大。

　　(10)總放大倍數的計算方法?放大倍數具體指面積的放大倍數還是長度的放大倍數?

　　總放大倍數等于目鏡放大倍數與物鏡放大倍數的乘積;放大倍數是指細小物體長度或寬度的放大倍數。

　　(11)放大倍數與視野中細胞大小、多少、視野明暗的關系?

　　放大倍數越大，視野中細胞越大、數目越少、視野越暗。

　　(12)更換目鏡，若異物消失，則異物在目鏡上;更換物鏡，若異物消失，則異物在物鏡上、移動載玻片，若異物移動，則異物在載玻片上。

　　(13)怎樣利用質壁分離現象來測定植物細胞液的濃度?①配制一系列濃度從小到大的蔗糖溶液②分別用以上不同濃度的溶液制成某植物細胞的臨時裝片③用顯微鏡觀察某植物細胞是否發生質壁分離。某植物細胞液的濃度就介于不能引起質壁分離的濃度和能引起質壁分離的濃度之間。

生物實驗報告8

　　一、實驗目的：

　　1、掌握顯示細胞中過氧化物酶反應的原理和方法。

　　2、了解細胞凋亡的生物學意義

　　3、掌握凋亡細胞的形態學檢測方法

　　二、實驗原理：

　　1、細胞內的過氧化物酶能把許多胺類氧化為有色化合物，用聯苯胺處理標本，細胞內的過氧化物酶能把聯苯胺氧化為藍色的聯苯胺藍，進而變為棕色產物，因而可以根據顏色反應來判定過氧化物酶的`有無或多少。中間產物藍色聯苯胺是不穩定的，無需酶的參加即可氧化為棕色化合物。

　　2、細胞凋亡是指細胞在生理或病理條件下，遵循自身的程序，自己結束其生命的過程。它是一個主動的、高度有序的，基因控制的，一系列酶參與的過程。

　　3、凋亡細胞形態學特征是:體積變小,細胞質濃縮;細胞核發生染色質凝聚和聚集于核膜周圍(邊緣化);細胞膜有小泡狀形成;晚期細胞膜內陷形成大小不同的凋亡小體;根據細胞凋亡形態學特征進行顯微觀察是檢測細胞凋亡的一種直觀、可靠的方法。

　　三、實驗步驟：

　　細胞中過氧化物酶的顯示

　　1、在載片上滴一滴PBS緩沖液；

　　2、取骨髓細胞：用斷頸法處死小鼠，立即剪取后肢，去除肌肉，剝出后肢股骨，剪開股骨一端，用牙簽尖的一端插入剪開的小孔中，摳取少許骨髓細胞置滴有PBS的載片上；

　　3、涂片：用另一玻片將骨髓細胞沿一個方向涂布推開，室溫晾干；

　　4、媒染：在涂片上滴0.5％硫酸銅液，以蓋滿涂片為宜，處理30秒-1分鐘。

　　5、傾去硫酸銅液，直接滴入聯苯胺混合液反應6分鐘（以蓋滿涂片為宜）

　　6、清水沖洗，番紅復染2min。

　　7、鏡檢：清水沖洗，室溫晾干，先低倍鏡下觀察，后換高倍鏡下觀察（油鏡100×）

　　細胞凋亡的形態學檢測與觀察吉姆薩染色:

　　1、取細胞爬片置于小培養皿中(有細胞面朝上)

　　2、生理鹽水輕輕漂洗細胞

　　3、95%乙醇固定5min

　　4、PBS緩沖液洗2次

　　5、吉姆薩染色液染色5min

　　6、蒸餾水輕輕洗去染液

　　7、普通光學顯微鏡下觀察。

　　吖啶橙染色:

　　1、取細胞爬片置于小培養皿中(有細胞面朝上)

　　2、生理鹽水輕輕漂洗細胞

　　3、甲醇：冰醋酸（3：1）固定5min

　　4、PBS緩沖液洗2次每次1min

　　5、0.01%吖啶橙染色液在避光環境下染色5min6、蒸餾水輕輕洗去染液

　　6、選用藍光激發濾片在熒光顯微鏡下觀察。

　　四、結果與分析：

　　根據隨機選擇的幾個視野的統計，該樣品的細胞凋亡率=227/506×100=44.9

　　Hela細胞凋亡過程中核染色質的形態變化（吖啶橙染色）

　　五、思考題：

　　1、細胞凋亡的調控機制

　　細胞凋亡是一個受基因調控、眾多細胞膜受體和胞漿蛋白參與的細胞主動自殺過程，其觸發因素多種多樣，包括細胞內誘導因子和抑制因子對細胞凋亡的調控。

　　2、細胞凋亡的特征

　　凋亡細胞形態學特征是:體積變小,細胞質濃縮;細胞核發生染色質凝聚和聚集于核膜周圍(邊緣化);細胞膜有小泡狀形成;晚期細胞膜內陷形成大小不同的凋亡小體。

　　3、研究細胞凋亡的方法

　　定性的研究方法：常規瓊脂糖凝膠電泳、脈沖場倒轉瓊脂糖凝膠電泳、形態學觀察（普通光學顯微鏡、透射電鏡、熒光顯微鏡）

　　定量或半定量的研究方法：各種流式細胞儀方法、原位末端標記法、ELISA定量瓊脂糖凝膠電泳。

生物實驗報告9

　　實驗生物組織中還原糖、脂肪、蛋白質的鑒定

　　一、實驗目的

　　初步掌握鑒定生物組織中還原糖、脂肪、蛋白質的基本方法。

　　二、實驗原理

　　1．還原糖的鑒定原理生物組織中普遍存在的還原糖種類較多，常見的有葡萄糖、果糖、麥芽糖。它們的分子內都含有還原性基團（游離醛基或游離酮基），因此叫做還原糖。蔗糖的分子內沒有游離的半縮醛羥基，因此叫做非還原性糖，不具有還原性。本實驗中，用斐林試劑只能檢驗生物組織中還原糖存在與否，而不能鑒定非還原性糖。

　　斐林試劑由質量濃度為0.1 g／mL的氫氧化鈉溶液和質量濃度為0.05g／mL的硫酸銅溶液配制而成，二者混合后，立即生成淡藍色的Cu(OH)2沉淀。Cu(OH)2與加入的葡萄糖在加熱的條件下，能夠生成磚紅色的Cu2O沉淀，而葡萄糖本身則氧化成葡萄糖酸。其反應式如下：

　　CH2OH—(CHOH)4—CHO＋2Cu(OH)2→CH2OH—(CHOH)4—COOH＋Cu2O↓＋2H2O

　　用斐林試劑鑒定還原糖時，溶液的顏色變化過程為：淺藍色棕色磚紅色(沉淀)。

　　2．蛋白質的鑒定原理鑒定生物組織中是否含有蛋白質時，常用雙縮脲法，使用的是雙縮脲試劑。雙縮脲試劑的成分是質量濃度為0.1 g／mL的氫氧化鈉溶液(A)和質量濃度為0.01 g／mL(B)的硫酸銅溶液。在堿性溶液(NaOH)中，雙縮脲(H2NOC—NH—CONH2)能與Cu2+作用，形成紫色或紫紅色的絡合物，這個反應叫做雙縮脲反應。由于蛋白質分子中含有很多與雙縮脲結構相似的'肽鍵，因此，蛋白質可與雙縮脲試劑發生顏色反應。

　　3．脂肪的鑒定原理脂肪可以被蘇丹Ⅲ染成橘黃色，被蘇丹Ⅳ 染成紅色

　　三、實驗過程（見書Ｐ18）

　　四、實驗用品（見書Ｐ18）

　　五、注意

　　1.關于鑒定還原糖的實驗，在加熱試管中的溶液時，應該用試管夾夾住試管上部，并放入盛開水的大燒杯中加熱。注意試管底部不要接觸燒杯底部，同時試管口不要朝向實驗者，以免試管內溶液沸騰時沖出試管，造成燙傷。如果試管內溶液過于沸騰，可以上提試管夾，使試管底部離開大燒杯中的開水。

　　2.斐林試劑的甲液和乙液混合均勻后方可使用，切勿將甲液和乙液分別加入組織樣液中。

　　3．蛋白質的鑒定中先加雙縮脲A，再加雙縮脲B

　　六、討論

　　鑒定生物組織中還原糖、脂肪、蛋白質的根據是什么？

生物實驗報告10

　　實驗教師：xxx

　　所在學校：xxx中學

　　目的要求：

　　1練習徒手切片

　　2認識葉片的結構

　　3畫葉片的表皮細胞和保衛細胞

　　材料用具：

　　新鮮葉片（如菠菜、槐樹、蠶豆的葉片），顯微鏡，雙面刀片（兩片、并在一起、一側用膠布粘牢）、鑷子、載玻片、蓋玻片、葉片的永久切片、盛有清水的培養皿、滴管、吸水紙、碘液、紗布、毛筆、小木板。

　　方法步驟

　　方法與步驟要點

　　注意事項

　　（一）練習徒手切片，制作葉片橫切片的臨時切片

　　1將新鮮的葉片平放在小木板上。

　　2右手捏緊并排的兩片刀片，沿著圖中虛線的方向，迅速切割。

　　3把刀片夾縫中存在的切下的薄片放入盛有清水培養皿中。要多切幾次（每切一次，刀片要蘸一下水）。

　　4用毛筆蘸出最薄的一片，制成臨時切片。葉片下面要墊上小塊木板，以防損壞桌面。刀片要捏緊，切割速度要快，注意安全。

　　為了便于觀察，載玻片的水滴中可以同時放幾片葉的橫切片，選擇切得最薄的一片用來觀察。

　　（二）觀察葉片的`結構

　　1．用顯微鏡先觀察葉片橫切面的臨時切片，再觀察葉片的永久橫切片。

　　2．觀察時注意分清時的表皮、葉肉和葉脈。

　　仔細觀察上、下表皮細胞的區別

　　（三）觀察葉片的下表皮

　　1．用鑷子撕下一小塊葉片的下表皮，制成臨時裝片。

　　2．用顯微鏡進行觀察，下表皮細胞的形態是什么樣子的，下表皮上有沒有氣孔？

　　撕取下表皮時，一定要薄，否則影響觀察效果。

　　注意觀察氣孔的結構。

　　（四）畫圖

　　在下面空白處畫出下表皮上一對保衛細胞及周圍的幾個表皮細胞，這一對保衛細胞要詳細畫，周圍的細胞只需勾出輪廓。

　　畫圖時，要真實、實事求是。

　　討論與交流

　　1．保衛細胞的結構特點對植物的蒸騰作用有什么意義？

　　2．從結構上看，葉片有哪些方面是適于接受陽光的？

生物實驗報告11

　　實驗目的

　　⒈學習并掌握動物細胞培養的無菌操作技術。

　　⒉了解原代細胞培養的基本方法及操作過程。

　　⒊學習細胞計數及營養液的配制。

　　實驗原理

　　⒈細胞原代培養

　　原代細胞培養是指直接從動物體內獲取的細胞、組織和器官，經體外培養后，直到第一次傳代為止。這種培養，首先用無菌操作的方法，從動物體內取出所需的組織（或器官），經消化，分解成單個游離細胞，在人工培養下，使其不斷的生長及繁殖。

　　細胞培養是一種操作繁瑣而又要求十分嚴謹的實驗技術。要使細胞能在體外長期生長，必須滿足兩個基本要求：一是供給細胞存活所必須的條件，如適量的水、無機鹽、氨基酸、維生素、葡萄糖及其有關的生長因子、氧氣、適宜的溫度，注意外環境酸堿度與滲透壓的調節。二是嚴格控制無菌條件。

　　⒉細胞死活鑒定死活細胞的鑒定方法有很多種，常用的有染色法和儀器分析法。染色法是常用的細胞死活鑒定方法，簡便，易于操作。不同的死活細胞鑒定方法有各自不同具體的反應機理，但無論采用何種辦法，都是利用了死活細胞在生理機能和性質上的差異。

　　染色法分化學染色法和熒光染色法，根據染色機理的不同，染料或使死細胞著色，或使活細胞著色。

　　死活細胞在生理機能和性質上的差異主要包括：

　　☆死活細胞細胞膜通透性的差異：活細胞的細胞膜是一種選擇性膜，對細胞起保護和屏障作用，只允許物質選擇性的通過；而細胞死亡之后，細胞膜受損，通透性增加。常用的以臺盼藍鑒別細胞死活的方法就是利用了這一性質。臺盼藍，又稱錐藍，是一種陰離子型染料，不能透過完整的細胞膜。所以經臺盼藍染色后只能使死細胞著色，而活細胞不被著色。甲基藍有類似的染色機理。植物細胞的質壁分離也可鑒定死活。

　　☆死活細胞在代謝上的差異：是采用美藍染料鑒定酵母細胞死活的依據。美藍是一種無毒染料，氧化型為藍色，還原型為無色。由于活細胞中新陳代謝的作用，使細胞內具有較強的還原能力，能使美藍從藍色的氧化性變為無色的還原型，因此美藍染色后活的酵母細胞無色；而死細胞或代謝緩慢的老細胞，則因它們的'無還原能力或還原能力極弱，使美藍處于氧化態，從而被染成藍色或淡藍色。

　　除此之外，還有一些細胞器的專有染料。如液泡系的專有染料中性紅。中性紅是一種低毒性染料，可以使活細胞液泡著紅色，而細胞質和細胞核不被著色；死細胞的液泡不被著色或淺染，染料彌散于整個細胞中，細胞核和細胞質被染成紅色。有時侯為了增加染色效果可以將兩種染料結合使用，如甲基藍-中性紅混合染色法。

　　實驗用品

　　⒈材料小白鼠

　　⒉試劑

　　臺盼藍、伊紅、PBS緩沖液、細胞培養液（含生長因子）

　　⒊器材

　　剪子、棉球、75%酒精、移液槍、無菌操作臺、正置光學顯微鏡、倒置光學顯微鏡、解剖盤、滴管、離心管、離心機、注射器、Eppendorf管、培養皿、酒精燈、塑料培養皿、載玻片、蓋玻片、血細胞計數板

　　實驗步驟

　　⒈取材

　　取小鼠一只，采用斷頭法處死。清水洗小鼠浸入75%酒精中消毒3min，取出轉入超凈工作臺內的解剖盤中，無菌操作打開腹腔，取出其脾臟，除去其周圍的脂肪組織，并用PBS液自上而下淋洗1-2次，轉入無菌培養皿中待用。

　　⒉分離脾細胞

　　用滴管向培養皿中注入30滴PBS緩沖液，再用“L”型針頭注射器在皿中吸取0.2毫升PBS液注入脾臟，注射時沿長軸注射。然后再用針頭在脾臟上扎眼，并用“L”型針頭輕輕刮出脾細胞。在均勻吹勻脾臟細胞。

　　吸取上述分離的單個脾細胞懸液，放入Eppendorf管中，使量至1mL，以1000r/min離心5min。⒊培養脾細胞

　　取塑料培養皿一套，用移液槍吸取培養液2mL加入塑料皿中，并將皿標記待用。取離心后的Eppendorf管，棄去上清液，用移液槍（200ul）吸取塑料皿中的培養液400ul加入棄去上清的Eppendorf管中，用槍頭吹勻管底的脾細胞，吸取200ul脾細胞懸液接種于上述塑料皿中，混勻后放入37°C，5%CO2的培養箱中培養。

　　⒋配制染液

　　用生理鹽水配成5%臺盼藍染液，備用。⒌染色

　　取0.5mL細胞懸濁液放入試管中，加入1-2滴染液。混合。2-5min后將細胞放在血細胞計數板上觀察死活情況，注意不要有

　　氣泡產生，放大倍數為10x10。染色后活細胞不著色，死細胞顯示藍色。注意染色時間不能超過15min，否則染液將細胞毒殺。

　　⒍計數

　　在10x10倍的顯微鏡下觀察，計算血細胞計數板的4個4小方格的細胞數量。包括細胞總數與死細胞數量。壓線者計上不計下，計左不計右。

　　⒎計算細胞活力

　　根據公式：細胞活力=(總細胞數-死細胞數)/總細胞數×100%

　　實驗結果

　　臺盼藍染色后的細胞（10x10）伊紅染色后的細胞（10x10）

　　總細胞數和活細胞數統計表（10×10）

　　項目自己培養細胞老師培養細胞總細胞數個/ml活細胞數個/ml細胞活力1.4×1067.5×1053.0×1055.5×10521.4%73.3%分析與討論

　　⒈結果分析

　　本次實驗中我們小組自己培養細胞所測細胞活力為21.4%，并不算高，分析得應有以下原因可能影響實驗結果（包括誤差）：

　　⑴若在無菌操作的過程中操作不規范，導致染菌，會極大的影響觀察，導致實驗失敗。

　　⑵若在離心分離呈單細胞的過程中離心機轉速過快或時間過長很可能會導致細胞破裂，導致小鼠脾細胞大量死亡。

　　⑶染色時間過長，或觀察時間過長都會導致染色試劑將細胞殺死，使細胞活力驟降，這是導致細胞活力比較低的重要原因。

　　⑷實驗中的一些操作不正確或不規范的情況、計算帶來的誤差等也會直接導致實驗誤差。

　　⒉注意事項

　　⑴嚴格進行動物消毒，需用75%酒精消毒。

　　⑵嚴格進行無菌操作，防止細菌、霉菌、支原體污染，避免化學物質污染。

　　⑶吸取液體前，瓶口和吸管硬行火焰消毒；吸取液體時，避免碰撞。

　　⑷離心管入臺前，管口、管壁應消毒。

　　⑸實驗者離開超凈臺時，要隨時用肘部關閉工作窗。

　　⑹器材使用時既要注意用火焰消毒，又要防止燙傷、燙死細胞。

生物實驗報告12

　　一、實驗目的初步掌握鑒定生物組織中還原糖、脂肪、蛋白質的基本方法。

　　二、實驗原理

　　1．還原糖的鑒定原理

　　生物組織中普遍存在的還原糖種類較多，常見的有葡萄糖、果糖、麥芽糖。它們的分子內都含有還原性基團（游離醛基或游離酮基），因此叫做還原糖。蔗糖的分子內沒有游離的半縮醛羥基，因此叫做非還原性糖，不具有還原性。本實驗中，用斐林試劑只能檢驗生物組織中還原糖存在與否，而不能鑒定非還原性糖。斐林試劑由質量濃度為0.1g／mL的氫氧化鈉溶液和質量濃度為0.05g／mL的硫酸銅溶液配制而成，二者混合后，立即生成淡藍色的Cu(OH)2沉淀。Cu(OH)2與加入的葡萄糖在加熱的條件下，能夠生成磚紅色的Cu2O沉淀，而葡萄糖本身則氧化成葡萄糖酸。其反應式如下：CH2OH—(CHOH)4—CHO＋2Cu(OH)2→CH2OH—(CHOH)4—COOH＋Cu2O↓＋2H2O用斐林試劑鑒定還原糖時，溶液的顏色變化過程為：淺藍色 棕色 磚紅色(沉淀)。

　　2．蛋白質的鑒定原理

　　鑒定生物組織中是否含有蛋白質時，常用雙縮脲法，使用的是雙縮脲試劑。雙縮脲試劑的成分是質量濃度為0.1g／mL的氫氧化鈉溶液(A)和質量濃度為0.01g／mL(B)的`硫酸銅溶液。在堿性溶液(NaOH)中，雙縮脲(H2NOC—NH—CONH2)能與Cu2+作用，形成紫色或紫紅色的絡合物，這個反應叫做雙縮脲反應。由于蛋白質分子中含有很多與雙縮脲結構相似的肽鍵，因此，蛋白質可與雙縮脲試劑發生顏色反應。

　　3．脂肪的鑒定原理

　　脂肪可以被蘇丹Ⅲ染成橘黃色，被蘇丹Ⅳ染成紅色

　　三、實驗過程（見書Ｐ18）

　　四、實驗用品（見書Ｐ18）

　　五、注意

　　關于鑒定還原糖的實驗，在加熱試管中的溶液時，應該用試管夾夾住試管上部，并放入盛開水的大燒杯中加熱。注意試管底部不要接觸燒杯底部，同時試管口不要朝向實驗者，以免試管內溶液沸騰時沖出試管，造成燙傷。如果試管內溶液過于沸騰，可以上提試管夾，使試管底部離開大燒杯中的開水。

　　2.斐林試劑的甲液和乙液混合均勻后方可使用，切勿將甲液和乙液分別加入組織樣液中。

　　3．蛋白質的鑒定中先加雙縮脲A，再加雙縮脲B六、討論鑒定生物組織中還原糖、脂肪、蛋白質的根據是什么？

生物實驗報告13

　　一、實驗目的

　　（一）掌握一般培養基的制備原理及要求，掌握培養基酸堿度的測定，熟悉一

　　般培養基的制備過程和各種器皿滅菌方法。

　　（二）掌握細菌分離培養的基本要領和方法，掌握細菌抹片的制備方法和革蘭

　　氏染色法及油鏡的使用方法，并認識革蘭氏染色的反應特性。

　　（三）掌握學習用微生物學原理診斷疾病的一般方法及步驟。

　　二、實驗用品

　　（一）器材

　　量筒、燒杯、電子天平、漏斗、三角燒瓶、空試劑瓶、玻璃棒、玻璃平皿、刻度吸管、ph試紙、紗布、脫脂棉、天平、電爐、試劑瓶瓶塞、扎繩、放大鏡、包裝紙、洗耳球、酒精燈、載玻片、火柴、吸水紙、剪刀、記號筆、接種環、注射器、鑷子、鉗子、毫米尺、培養箱、水浴培養箱、高壓蒸汽滅菌鍋、油鏡

　　（二）試劑及材料

　　肘胨、蛋白胨、豬膽鹽、氯化鈉、瓊脂、乳糖、0.01%結晶紫水溶液、0.5%中性紅水溶液、血清、胰化蛋白胨、酵母提取物、氫氧化鈉、鹽酸、牛血清、革蘭氏染色液、蒸餾水、小白鼠、病豬內臟

　　三、實驗步驟

　　（一）培養基的制備

　　（所有用到的器皿都已121℃高壓滅菌15~30min，傾注平板在無菌操作臺內完成，并放在無菌操作臺內）

　　1、麥康凱培養基

　　（1）組成：蛋白胨17g、肘胨3g、豬膽鹽5g、氯化鈉5g、瓊脂17g、乳糖

　　10g、0.01%結晶紫水溶液10ml、0.5%中性紅水溶液5ml、蒸餾水1000ml

　　（2）方法：將蛋白胨、肘胨、豬膽鹽和氯化鈉溶解于400ml蒸餾水中，調節

　　ph至7.2。將瓊脂加入600ml蒸餾水中，并加入乳糖，加熱熔化。將兩

　　液混合，分裝于燒瓶內，用紗布、扎繩等捆好后，121℃高壓滅菌

　　15~30min。待冷卻至50~ 55℃時，加入結晶紫和中性紅水溶液，搖勻后

　　傾注平板。

　　注：結晶紫和中性紅水溶液配好后需經高壓滅菌。

　　2、血清平板

　　（1）組成：營養瓊脂、牛血清

　　（2）方法：將滅菌的營養瓊脂加熱熔化，冷卻至45~50℃時，加入牛血清，并

　　混勻，傾注平板。

　　注：不得將牛血清一并加入后再滅菌。

　　3、lb培養基

　　（1）組成：胰化蛋白胨10g、酵母提取物5g、氯化鈉10g、瓊脂15g

　　（2）方法：在950ml蒸餾水中加入胰化蛋白胨、酵母提取物、瓊脂和氯化鈉，調節ph至7.4，加熱熔化，分裝于瓶中，用紗布、扎繩等捆好后，121℃高壓滅菌15~30min。待冷卻至50~ 55℃時，傾注平板。

　　4、液體培養基（在lb培養基的基礎上，裝入大試劑瓶中，不加瓊脂，不分裝）

　　（二）病料取材

　　在病豬死亡后，首先用顯微鏡檢查其末梢血液膜片中是否有炭疽桿菌存在，未發現，則立即用消毒的器械對其進行生理解剖，觀察其病理特征現象，取出病豬的十二指腸、胃、肝臟三處的組織物，并注意組織的完整性，用儲物袋密封保存。

　　（三）細菌粗培養

　　1、消毒滅菌：操作人員先用消毒水清洗手或戴好實驗手套，再用消毒水對無菌操作臺內桌面及用酒精燈外焰對待用器械進行火焰滅菌。

　　2、接種

　　（1）在無菌操作臺酒精燈旁打開用儲物袋密封保存的病料，先左手持鑷子右

　　手持剪刀，把病料剪出一個小口。

　　（2）右手持滅過菌的接種環，左手持平板，并用拇指、食指及中指將平皿揭

　　開約20左右，然后將接種環前端插入小口旋轉一下后，再用劃線接種的方法接種到一個血清平板上。

　　（3）用記號筆在平板底部作好日期、操作人員、部位等標記，并將平板倒放。

　　以此方法，分別接種十二指腸、胃粘膜、肝臟于血清平板上，各接種2個血清平板。

　　3、培養：將接種好的血清平板倒扣放入37℃培養箱中，反向培養24小時。注：劃線接種時盡量劃開，以保證長出單個菌落，且劃線時接種環應盡量傾斜，以免劃破培養基（后同）；待接種完畢后熄滅無菌操作臺內酒精燈，關閉好無菌操作臺窗口，打開無菌操作臺內的紫外燈。 。

　　（四）細菌純培養

　　1、菌落特征判斷

　　待粗培養的細菌培養24小時后，取出用放大鏡觀察記錄單個小菌落的形態特征并用實驗報告紙記錄好，并在平板底部上做好觀察標記，其形態特征包括大小、形狀、菌落邊緣、表面構造、隆起度、濕潤度、透明度、顏色等。

　　2、取單個菌落進行革蘭氏染色鏡檢

　　（1）取干凈的載玻片，用記號筆在其一面做好正反面標記，再在載玻片另一

　　面中央滴上一小滴蒸餾水。

　　（2）將接種環在火焰上滅菌，待冷卻后，在酒精燈旁從標記的單個小菌落中

　　取少許細菌置于蒸餾水中混勻（同時蓋好平板倒扣置于一旁），用接種環涂成直徑約1.5cm的菌膜，再在酒精燈火焰上方以鐘擺速度通過固定好細菌，待冷卻進行染色。

　　（3）先滴加草酸結晶紫溶液染色1~2min，再水洗；然后滴加革蘭氏碘液溶液

　　染色1~2min，再水洗；隨后滴加95%的酒精脫色30~60s，再水洗；最后滴加稀釋的品紅進行復染30~60s，再水洗；待干燥或吸水紙吸干后鏡檢。

　　（4）將干燥的載玻片放在1000倍油鏡下，滴加一滴松柏油進行鏡檢，觀察其

　　形態特征，判斷細菌的'種屬。

　　3、細菌接種培養

　　（1）消毒滅菌：操作人員先用消毒水清洗手或戴好實驗手套，再用消毒水對

　　無菌操作臺內桌面及用酒精燈外焰對待用器械進行火焰滅菌。

　　（2）接種：右手持滅過菌的接種環，左手持平板，并用拇指、食指及中指將

　　平皿揭開約20左右，然后將接種環插入揭開的平板口內蘸去一下鏡檢標記的小菌落，再用劃線接種的方法接種到一個血清平板、lb平板或麥康凱平板上。并用記號筆在平板底部作好日期、操作人員、菌種、部位等標記，將平板倒放。

　　（3）將接種好的平板倒扣放入37℃培養箱中，反向培養24小時。

　　注：油鏡用完后應立即清理物鏡上的松柏油；劃線接種時盡量劃開，以保證長出單個菌落；待接種完畢后熄滅無菌操作臺內酒精燈，關閉好無菌操作臺窗口，打開無菌操作臺內的紫外燈。 。

　　（五）菌液的制備

　　1、鏡檢：用革蘭氏染色法在1000倍油鏡下鏡檢，觀察并記錄是否為純培養的細菌。

　　2、分裝液體培養基：先對無菌操作臺及需要使用的器械進行消毒滅菌，然后用鉗子揭開一個空試劑瓶，用傾倒的方法在酒精燈旁從液體培養基大試劑瓶中分裝于空試劑瓶內，并立即蓋上液體培養基大試劑瓶瓶塞。

　　3、接種：右手持接種環，用火焰對其進行滅菌，待冷卻后，取出純培養的平板，在無菌操作臺內酒精燈旁，蘸去少許細菌，左手傾斜液體培養基，將接種環，伸入液體培養基內攪動，然后取出對接種火焰環滅菌，并用滅菌的包裝紙捆綁好后，用記號筆做好相應標記，置于一旁。

　　4、培養搖菌：將接種好的液體培養基置于水浴培養箱中培養24小時。注：分裝一個培養基就接種一個培養基，不得全部分裝完后再一個一個接種。

　　（六）小鼠致病性實驗

　　1、保定：選擇健康的青壯年小白鼠，先用右手抓住尾巴，旋轉數周讓其眩暈，然后用左手的拇指和食指捏住兩耳及頭部皮膚，并翻轉左手，使其頭部朝下，以達到內臟前移的目的。

　　2、接種：先用酒精棉球蘸取酒精對注射部位擦洗消毒，再用注射器注射吸取0.2ml菌液注射于小白鼠腹腔中。

　　3、觀察：將接種的小白鼠放在適宜的環境下生活，并在鼠籠處用記號筆標記好接種時間、菌種等。

　　4、再培養鑒定：待小白鼠死亡后，對其進行解剖，觀察其內臟病變情況，并取肝臟直接涂在相應培養基上，在適宜條件下反向培養24小時后，取菌落細菌進行鏡檢觀察判斷。

　　注：在注射小白鼠2小時候需要觀察小白鼠是否因注射時傷害到內臟而死亡。

生物實驗報告14

　　一、實驗目的

　　1. 學會提取和分離葉綠體中色素的方法。

　　2. 比較、觀察葉綠體中四種色素：理解它們的特點及與光合作用的關系

　　二、實驗原理

　　光合色素主要存在于高等植物葉綠體的基粒片層上，而葉綠體中的色素能溶于有機溶劑

　　中。故要提取色素，要破壞細胞結構，破壞葉綠體膜，使基粒片層結構直接與有機溶劑接

　　觸，使色素溶解在有機溶劑中。

　　葉綠體中的'色素有四種，不同色素在層析液(脂溶性強的有機溶劑)中的溶解度不同，

　　因而隨層析液的擴散速度也不同。

　　三、材料用具

　　取新鮮的綠色葉片、定性濾紙、燒杯、研缽、漏斗、紗布、剪刀、小試管、培養皿、毛細吸管、量筒、有機溶劑、層析液(20份石油醚、2份丙酮、1份苯混合)、二氧化硅、碳酸鈣。

　　四、實驗過程（見書Ｐ54）

　　1.提取色素：

　　2.制備濾紙條：

　　3.色素分離，紙層析法。（不要讓濾液細線觸及層析液）

　　4.觀察：

　　層析后，取出濾紙，在通風處吹干。觀察濾紙條上出現色素帶的數目、顏色、位置和寬窄。結果是：4條色素帶從上而下依次是：胡蘿卜素(橙黃色)、葉黃素(黃色)、葉綠素a(藍綠色)、葉綠素b(黃綠色)。

　　五、討論

　　1.濾紙條上的濾液細線為什么不能接觸到層析液？

　　2．提取和分離葉綠體中色素的關鍵是什么？

生物實驗報告15

　　一、實驗目的

　　1、觀察植物細胞有絲分裂的過程，識別有絲分裂的不同時期。

　　2、初步掌握制作洋蔥根尖有絲分裂裝片的技能。

　　3、初步掌握繪制生物圖的方法。

　　二、實驗原理

　　在植物體中，有絲分裂常見于根尖、莖尖等分生區細胞，高等植物細胞有絲分裂的.過

　　程，分為分裂間期和分裂期的前期、中期、后期、末期。可以用高倍顯微鏡觀察植物細胞的

　　有絲分裂的過程，根據各個時期細胞內染色體（或染色質）的變化情況，識別該細胞處于有

　　絲分裂的哪個時期，細胞核內的染色體容易被堿性染料著色。

　　三、材料用具

　　洋蔥根尖、顯微鏡、載玻片、蓋玻片、滴管、鑷子、培養皿、鉛筆、質量分數為15%的鹽酸、

　　體積分數為95%的酒精、質量分數為0.01g/ml的龍膽紫（或紫藥水）

　　四、實驗過程（見書Ｐ39）

　　1、洋蔥根尖的培養（提前3—4天）

　　2、解離：5min

　　3、漂洗：10min

　　4、染色：5min

　　5、制片

　　6、鏡檢

　　五、注意

　　1、解離充分是實驗成功的必備條件。解離充分，組織才能分散，細胞也不會重疊。

　　2、漂洗時間一定要足夠，否則細胞染不上色。

　　3、染色時，染液的濃度和染色時間必須掌握好。特別是染色不能過深，否則鏡下一片紫色，無法觀察。

　　六、討論

　　1、制作好洋蔥根尖有絲分裂裝片的關鍵是什么？談談你自己的體會。

　　2、在觀察清楚有絲分裂各個時期的細胞以后，繪出洋蔥根尖細胞有絲分裂的簡圖，并標明時期。

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